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浙江检验学备考资料:化学发光免疫分析技术

来源:中公浙江卫生人才网 时间:2020-07-24 09:41:34

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化学发光免疫分析是用化学发光剂直接标记的抗原或抗体与待测标本中相应抗体和抗原、磁性颗粒标记的抗原或抗体反应,通过磁场把结合状态和游离状态的化学发光剂标记物分离出来,然后在结合状态部分中加入发光促进剂进行发光反应,通过对结合状态发光强度的检测进行定量和定性检测。

根据化学发光分析中标志物的不同及反应原理的不同可分为直接化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析、电化学发光免疫分析三类。关于这三种不同的方法具体有什么不同,小编用一个表格帮大家总结归纳出来:

化学发光酶免疫测定

用酶来标记抗体(或抗原),与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应,形成固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物。洗涤后,再加入底物(发光剂),酶催化和分解底物发光,计算出测定物的浓度。

标记酶:辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶(ALP)

发光底物:鲁米诺、AMPPD

固相载体:磁性微粒

 

直接化学发光免疫测定

 

用化学发光剂直接标记抗原或抗体

发光底物:吖啶酯

吖啶脂在碱性环境中即可被过氧化氢氧化而发光

电化学发光免疫测定

 

第一步在试管中进行,反应物为标记抗体、吸附在磁性微球上的固相抗体以及受检的标本。反应后除去多余的未结合的标记抗体和固相抗体;

第二步是将反应液输入特殊的检测仪器的反应室中,随即用含电子供体三丙胺的缓冲液冲洗。反应室电极下有磁铁。含磁性微球的夹心复合物及游离的固相抗体被吸附在电极表面,游离的标记抗体随冲洗液流出。此时在反应室中即发生电化学发光反应。发出的光由光电倍增管转为信号,通过电信号的测定反映标本中抗原的含量。

发光底物:三联吡啶钌

电子供体:三丙胺(TPA)

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